改良焦性沒食子酸法培養(yǎng)厭氧菌介紹

1 .. 材料與方法 ( 1) 普通焦性沒食子酸法: 將厭氧菌接**血瓊脂平皿上, 在該平皿蓋的外側(cè)面中央放直徑4 cm 左右的圓 
形紗布兩層, 其上放焦性沒食子酸0..2 g 再蓋同等大小紗布兩層, 然后加質(zhì)量分?jǐn)?shù)10%NaOH 溶液0..5 mL, 迅 
速將平皿倒置于其上, 平皿周圍用溶化石蠟封閉, 放37 .. 培養(yǎng)24~ 48 h 后取出觀察。 ( 2) 改良焦性沒食子酸法: 于上述普通方法基礎(chǔ)上, 在血瓊脂平皿配制和培養(yǎng)用化學(xué)品的組成方面加以改 
良, 一是用濾紙制成小袋, 袋內(nèi)含適量碳渣代替紗布或棉花; 二是用無水碳酸鈉代替氫氧化鈉; 三是在配制血 
瓊脂平皿時(shí), 加入少量葡萄糖, 終質(zhì)量濃度為2 g/ L。其方法為先用濾紙制成小袋3 cm .. 5 cm, 每袋含量為焦 性沒食子酸0..5 g、無水碳酸鈉0..5 g 、碳渣2..5 g, 分別研磨成碎粉, 臨用時(shí)再混合, 裝入袋內(nèi), 膠水封閉, 將袋放 
入該平皿蓋的外側(cè)面中央, 迅速將平皿倒置于其上, 其余方法同上。 2 .. 結(jié)果 
.. .. 厭氧菌在普通焦性沒食子酸法培養(yǎng)基中, 經(jīng)37 .. , 培養(yǎng)48 h 后, 破傷風(fēng)桿菌在血平皿上分離出單個(gè)不規(guī) 
則形菌落, 有明顯溶血環(huán)。但放置室溫48 h 后, 整個(gè)平皿溶血, 溶血環(huán)消失, 平皿內(nèi)水分較多。產(chǎn)氣莢膜桿菌 
在培養(yǎng)24 h 后, 分離出單個(gè)菌落, 有明顯溶血環(huán), 但典型雙層溶血環(huán)不太明顯。 
破傷風(fēng)桿菌在改良的焦性沒食子酸法培養(yǎng)基中, 經(jīng)37 .. , 培養(yǎng)48 h 后, 血平皿上分離出非常典型的單個(gè) 
不規(guī)則菌落, 中心緊密, 四周疏松, 邊緣不整齊, 有明顯溶血環(huán), 環(huán)呈多角形。產(chǎn)氣莢膜桿菌在培養(yǎng)24 h 后, 明 
顯分離出單個(gè)菌落, 直徑2~ 5 mm, 半透明, 表面光滑, 邊緣整齊, 在血平皿上可見清晰的雙層溶血環(huán), 內(nèi)環(huán)完 
全溶血, 外環(huán)不完全溶血, 放置室溫48 h 后仍保持典型培養(yǎng)特性[ 2] 。 3 .. 討論 
.. .. 從改良前后培養(yǎng)厭氧菌比較可  
                              
                     以看出, 改良后在血平皿上培養(yǎng)破傷風(fēng)桿菌能分離出非常典型的單個(gè)不規(guī) 
則形菌落, 有明顯溶血環(huán); 產(chǎn)氣莢膜桿菌在培養(yǎng)24 h 后, 明顯分離出單個(gè)菌落, 在血平皿上可見清晰的雙層溶 
血環(huán), 內(nèi)環(huán)完全溶血, 外環(huán)不完全溶血, 在鑒別厭氧菌上具有重要意義。特別是培養(yǎng)好后的平板, 可以在無菌