細(xì)胞培養(yǎng)常用設(shè)備及實(shí)驗(yàn)技巧(三)器械的清洗和消毒

玻璃器械洗消:

一、新的玻璃器皿的洗消:

1.自來水刷洗,除去灰塵。

2.烘干、泡鹽酸:烤箱中烘干,然后再浸入5%稀鹽酸中12小時(shí)以除去臟物、鉛、砷等物。

3.刷洗、烘干:12小時(shí)后立即用自來水沖洗,再用洗滌劑刷洗,自來水沖干凈后用烤箱烘干。

4.泡酸、清洗:用清潔液(重鉻酸鉀120g:濃硫酸200ml:蒸餾水1000ml)浸泡12小時(shí),然后從酸缸內(nèi)撈出器皿用自來水沖洗15次,**后蒸餾水沖洗3~5次和用雙蒸水過3次。

5.烘干、包裝:洗干凈后先烘干,然后用牛皮紙(油光紙)包裝。

6.高壓消毒:包裝好的器皿裝入高壓鍋內(nèi)蓋好蓋子,打開開關(guān)和安全閥,當(dāng)蒸氣成直線上升時(shí),關(guān)閉安全閥,當(dāng)指針指向15磅時(shí),維持20~30分鐘。

7.高壓消毒后烘干。

二、舊的玻璃器皿的洗消:

1.刷洗、烘干:使用過的玻璃器皿可直接泡入來蘇爾液或洗滌劑溶液中,泡過來蘇爾溶液(洗滌劑)的器皿要用清水刷洗干凈,然后烘干。

2.泡酸、清洗:烘干后泡入清潔液(酸液),12小時(shí)后從酸缸內(nèi)撈出器皿立即用自來水沖洗(避免蛋白質(zhì)干涸后粘附于玻璃上難以清洗),再用蒸餾水沖洗3次。

3.烘干、包裝:洗干凈的器皿烘干后取出用牛皮紙(油光紙)等包裝,以便于消毒儲(chǔ)存及防止灰塵和再次被污染。

4.高壓消毒:包裝好的器皿裝入高壓鍋內(nèi),蓋好蓋子,打開開關(guān)和安全閥,隨著溫度的上升安全閥冒出蒸氣,當(dāng)蒸氣成直線冒出3~5分鐘后,關(guān)閉安全閥,氣壓表指數(shù)隨之上升,當(dāng)指針指向15磅時(shí),調(diào)節(jié)電開關(guān)維持20~30分鐘即可。(玻璃培養(yǎng)瓶消毒前可將膠帽輕輕蓋上)

5.烘干備用:因?yàn)楦邏合竞笃髅髸?huì)被蒸氣打濕,所以要放入烤箱內(nèi)烘干備用。

金屬器械洗消:

金屬器皿不能泡酸,洗消時(shí)可先用洗滌劑刷洗,后用自來水沖干凈,然后用75%酒精擦拭,再用自來水,然后用蒸餾水沖洗,再烘干或空氣中晾干。放入鋁制盒內(nèi)包裝好在高壓鍋內(nèi)15磅高壓(30分鐘)消毒,再烘干備用。

橡膠和塑料:

橡膠和制品通常處理方法是:先用洗滌劑洗刷干凈,再分別用自來水和蒸餾水沖干凈,再用烤箱烘干,然后根據(jù)不同品質(zhì)進(jìn)行如下的處理程序:

1 . 針式濾器帽不能泡酸液,用NaOH泡6~12小時(shí),或者煮沸20分鐘,在包裝之前要裝好濾膜兩張,安裝濾膜時(shí)注意光面朝上(凹向上),然后將螺旋稍微擰松一些,放入鋁盒中在高壓鍋內(nèi)15磅30分鐘消毒,再烘干備用。注意在超凈臺(tái)內(nèi)取出使用時(shí)應(yīng)該立即將螺旋旋緊。 

2. 膠塞烘干后用2%氫氧化鈉溶液煮沸30分鐘(用過的膠塞只要用沸水處理30分鐘),自來水洗凈,烘干。然后再泡入鹽酸液30分鐘,再用自來水,蒸餾水,三蒸水洗凈,烘干。**后裝入鋁盒內(nèi)高壓消毒,烘干備用。 

3. 膠帽,離心管帽烘干后只能在2%氫氧化鈉溶液中浸泡6~12小時(shí)(切記時(shí)間不能過長),自來水洗凈,烘干。然后再泡入鹽酸液30分鐘,再用自來水,蒸餾水,三蒸水洗凈,烘干。**后裝入鋁盒內(nèi)高壓消毒,烘干備用。 

4. 膠頭可用75%酒精浸泡5分鐘,然后紫外照射后使用即可。

5.塑料培養(yǎng)瓶,培養(yǎng)板,凍存管:

6.其他消毒方法:有的物品既不能干燥消毒,又不能蒸氣消毒,可用70%酒精浸泡消毒。塑料培養(yǎng)皿打開蓋子,放在超凈臺(tái)臺(tái)面上,直接暴露在紫外線下消毒。也可用氧化乙烯消毒塑料制品,消毒后需要用2~3周時(shí)間洗除殘留的氧化乙烯。用20000~100000rad的r射線消毒塑料制品效果**好。 

為了防止清洗器材已消毒與末消毒發(fā)生混淆,可在紙包裝后,用密寫墨水作好標(biāo)記。其法即用沾水筆或毛筆沾以密寫墨水,在包裝紙上作一記號,平時(shí)這種墨水不帶痕跡,一經(jīng)高溫,即出現(xiàn)字跡,從而可以判定它們是否消毒。密寫墨水的配制:氯化鉆(CoCI2•6H2O)2g,30%鹽酸10m1,蒸餾水88m1。 

注意事項(xiàng):

1.嚴(yán)格執(zhí)行高壓鍋的操作規(guī)程:高壓消毒時(shí),先檢查鍋內(nèi)是否有蒸餾水,以防高壓時(shí)燒干,水不能過多因?yàn)槠鋵⑹箍諝饬鲿呈茏?,?huì)降低高壓消毒效果。檢查安全閥是否通暢,以防高壓時(shí)爆炸。 

2.安裝濾膜時(shí)注意光面朝上:注意濾膜光滑一面是正面,要朝上,否則起不到過濾的作用。

3.注意人體的防護(hù)和器皿的完全浸泡:A.泡酸時(shí)要戴耐酸手套,防止酸液濺起傷害人體。B.從酸缸內(nèi)撈取器皿時(shí)防止酸液濺到地面,會(huì)腐蝕地面。C.器皿浸入酸液中要完全,不能留有氣泡,以防止泡酸不徹底。

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