實(shí)驗(yàn)室常用緩沖液配置方案

1)1 M Tris-HCl (pH7.4, 7.6, 8.0)
組份濃度：1 M Tris-HCl
配制量：1 L
配制方法：
1. 稱(chēng)量121.1 g Tris置于1 L燒杯中。
2. 加入約800 ml的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙狻?br /> 3. 按下表量加入濃鹽酸調(diào)節(jié)所需要的pH值。

PH值
濃HCl

7.4
約70ml

7.6
約60ml

8.0
約42ml


4. 將溶液定容**1 L。
5. 高溫高壓滅菌后，室溫保存。
注意：應(yīng)使溶液冷卻**室溫后再調(diào)定pH值，因?yàn)門(mén)ris溶液的pH值隨溫度的變化差異很大，溫度每升高1℃，溶液的pH值大約降低0.03個(gè)單位。
2)10×TE Buffer (pH7.4, 7.6, 8.0)
組份濃度：100 mM Tris-HCl, 10 mM EDTA
配制量：1 L
配制方法：
1. 量取下列溶液，置于1 L燒杯中。

1M Tris－HCl Buffer（PH7.4，7.6，8.0）
100ml

500mM EDTA(PH8.0)
20ml


2. 向燒杯中加入約800 ml的去離子水，均勻混合。
3. 將溶液定容**1 L后，高溫高壓滅菌。
4. 室溫保存。

3)1.5 M Tris-HCl (pH8.8)
組份濃度：1.5 M Tris-HCl
配制量：1 L
配制方法：
1. 稱(chēng)量181.7 g Tris置于1 L燒杯中。
2. 加入約800 ml的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙狻?br /> 3. 用濃鹽酸調(diào)節(jié)pH值**8.8。
4. 將溶液定容**1 L。
5. 高溫高壓滅菌后，室溫保存。
注意：應(yīng)使溶液冷卻**室溫后再調(diào)定pH值，因?yàn)門(mén)ris溶液的pH值隨溫度的變化差異很大，溫度每升高1℃，溶液的pH值大約降低0.03個(gè)單位。

4)3 M 醋酸鈉(pH5.2)
組份濃度：3M 醋酸鈉
配制量：100ml
配制方法：
1.稱(chēng)量40.8g NaAc·3H2O置于100-200ml燒杯中，加入月40ml的去離子水?dāng)嚢枞芙?br /> 2.加入冰醋酸調(diào)節(jié)pH值**5.2
3.加去離子水將溶液定容**100ml
4高溫高壓滅菌后，室溫保存。
5)PBS Buffer
組份濃度：137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10 mM Na2HPO4, 2 mM KH2PO4
配制量：1 L
配制方法：
1. 稱(chēng)量下列試劑，置于1 L燒杯中。

NaCl
8g

KCl
0.2g

Na2HPO4
1.42g

KH2PO4
0.27g


2. 向燒杯中加入約800 ml的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙狻?br /> 3. 滴加濃鹽酸將pH值調(diào)節(jié)**7.4，然后加入去離子水將溶液定容**1 L。
4. 高溫高壓滅菌后，室溫保存。
注意：上述PBS Buffer中無(wú)二價(jià)陽(yáng)離子，如需要，可在配方中補(bǔ)充1 mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。
6)10 M 醋酸銨
組份濃度：10 M 醋酸銨

配制量：100 ml
配制方法：
1. 稱(chēng)量77.1 g醋酸銨置于100～200 ml燒杯中，加入約30 ml的去離子水?dāng)嚢枞芙狻?br /> 2. 加去離子水將溶液定容**100 ml。
3. 使用0.22 mm濾膜過(guò)濾除菌。
4. 密封瓶口于室溫保存。
注意：醋酸銨受熱易分解，所以不能高溫高壓滅菌。
7)苯酚/氯仿/異戊醇 (25 : 24 : 1)
配制方法：
1. 說(shuō)明：從核酸樣品中除去蛋白質(zhì)時(shí)常常使用苯酚/氯仿/異戊醇（25 : 24 : 1)。氯仿可使蛋白質(zhì)變性并有助于液相與有機(jī)相的分離，而異戊醇則有助于消除抽提過(guò)程中出現(xiàn)的氣泡。
2. 配制方法：將Tris-HCl平衡苯酚與等體積的氯仿/異戊醇（24 : 1）混合均勻后，移入棕色玻璃瓶中4℃保存。

8）10％ (W/V) SDS
組份濃度：10％ (W/V)SDS
配制量：100ml
配制方法：
1.稱(chēng)量10g高純度的SDS置于100-200ml燒杯中，加入約80ml的去離子水，68℃加入溶解
2.滴加濃鹽酸調(diào)節(jié)pH值**7.2
3.將溶液定容**100ml后，室溫保存。
9）2 N NaOH
組份濃度：2 N NaOH
配制量：100 ml
配制方法：
1. 量取80 ml去離子水置于100～200 ml塑料燒杯中（NaOH溶解過(guò)程中大量放熱，有可能使玻璃燒杯炸裂)。
2. 稱(chēng)取8 g NaOH小心地逐漸加入到燒杯中，邊加邊攪拌。
3. 待NaOH完全溶解后，用去離子水將溶液體積定容**100 ml。
4. 將溶液轉(zhuǎn)移**塑料容器中后，室溫保存。

10）2.5 N HCl
組份濃度：2.5 N HCl
配制量：100 ml
配制方法：
1. 在78.4 ml的去離子水中加入21.6 ml的濃鹽酸（11.6 N)，均勻混合。
2. 室溫保存。
11）5 M NaCl
組份濃度：5 M NaCl
配制量：1 L
配制方法：
1. 稱(chēng)取292.2 g NaCl置于1 L燒杯中，加入約800 ml的去離子水后攪拌溶解。
2. 加去離子水將溶液定容**1 L后，適量分成小份。
3. 高溫高壓滅菌后，4℃保存。
11）20％ (W/V) Glucose
組份濃度：20％ (W/V) Glucose
配制量：100 ml
配制方法：
1. 稱(chēng)取20 g Glucose置于100～200 ml燒杯中，加入約80 ml的去離子水后，攪拌溶解。
2. 加去離子水將溶液定容**100 ml。
3. 高溫高壓滅菌后，4℃保存。

12）Solution I(質(zhì)粒提取用)
組份濃度：25 mM Tris-HCl（pH8.0), 10 mM EDTA, 50 mM Glucose
配制量：1 L
配制方法：
1. 量取下列溶液，置于1 L燒杯中。

1M Tris-HCl（PH8.0）
25ml

0.5M EDTA（PH8.0）
20ml

20％Glucose（1.11M）
45ml

dH2O
910ml


2. 高溫高壓滅菌后，4℃保存。
3. 使用前每50 ml的Solution I中加入2 ml的RNase A（20 mg/ml)。

13）Solution II(質(zhì)粒提取用)
組份濃度：200mM NaOH，1％(W/V)SDS
配制量：500ml
配制方法：
1.量取下列溶液，置于500ml燒杯中
10％ SDS 50ml
2N NaOH 50ml
2.加滅菌水定容**500ml，充分混勻
3.室溫保存，此溶液保存時(shí)間**好不要超過(guò)一個(gè)月
注意：SDS易產(chǎn)生氣泡，不要?jiǎng)×覕嚢?br />
14）Solution III(質(zhì)粒提取用)
組份濃度：3 M KOAc, 5 M CH3COOH
配制量：500 ml
配制方法：
1. 稱(chēng)量下列試劑，置于500 ml燒杯中。

KOAc
147g

CH3COOH
57.5ml


2. 加入300 ml去離子水后攪拌溶解。
3. 加去離子水將溶液定容**500 ml。
4. 高溫高壓滅菌后，4℃保存。

15）0.5 M EDTA(pH8.0)
組份濃度：0.5 M EDTA
配制量：1 L
配制方法：

稱(chēng)取186.1 g Na2EDTA·2H2O，置于1 L燒杯中。
2. 加入約800 ml的去離子水，充分?jǐn)嚢琛?br /> 3. 用NaOH調(diào)節(jié)pH值**8.0（約20 g NaOH)。
注意：pH值**8.0時(shí)，EDTA才能完全溶解。
4. 加去離子水將溶液定容**1 L。
5. 適量分成小份后，高溫高壓滅菌。
6. 室溫保存。

16）1 M DTT

組份濃度：1 M DTT
配制量：20 ml
配制方法：
1. 稱(chēng)取3.09 g DTT，加入到50 ml塑料離心管內(nèi)。
2. 加20 ml的0.01 M NaOAc（pH5.2)，溶解后使用0.22 mm濾器過(guò)濾除菌。
3. 適量分成小份后，-20℃保存。

17）10 mM ATP
組份濃度：10 mM ATP
配制量：20 ml
配制方法：
1. 稱(chēng)取121 mg Na2ATP·3H2O，加入到50 ml塑料離心管內(nèi)。
2. 加20 ml的25 mM Tris-HCl（pH8.0)，攪拌溶解。
3. 適量分成小份后，-20℃保存。

一.常用貯液與溶液

1mol/L亞精胺（Spermidine）: 溶解2.55g亞精胺于足量的水中，使終體積為10ml。分裝成小份貯存于-20℃。

1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使終體積為10ml。分裝成小份貯存于-20℃。

10mol/L乙酸胺（ammonium acetate）：將77.1g乙酸胺溶解于水中，加水定容**1L后，用0.22um孔徑的濾膜過(guò)濾除菌。

10mg/ml牛血清蛋白(BSA）：加100mg的牛血清蛋白（組分V或分子生物學(xué)試劑級(jí)，無(wú)DNA酶）于9.5ml水中（為減少變性，
須將蛋白加入水中，而不是將水加入蛋白），蓋好蓋后，輕輕搖動(dòng)，直**牛血清蛋白完全溶解為止。不要渦旋混合。加水定容到10ml，然后分裝成小份貯存于-20℃。

1mol/L二硫蘇糖醇（DTT）：在二硫蘇糖醇5g的原裝瓶中加32.4ml水，分成小份貯存于-20℃。或轉(zhuǎn)移100mg的二硫蘇糖醇
**微量離心管，加0.65ml的水配制成1mol/L二硫蘇糖醇溶液。

8mol/L乙酸鉀（potassium acetate）：溶解78.5g乙酸鉀于足量的水中，加水定容到100ml。

1mol/L氯化鉀（KCl）：溶解7.46g氯化鉀于足量的水中，加水定容到100ml。

3mol/L乙酸鈉（sodium acetate）：溶解40.8g的三水乙酸鈉于約90ml水中，用冰乙酸調(diào)溶液的pH**5.2，再加水定容到100ml。

0.5mol/L EDTA:配制等摩爾的Na2EDTA和NaOH溶液（0.5mol/L），混合后形成EDTA的三鈉鹽?；蚍Q(chēng)取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH，并溶于水中，定容**1L。

1mol/L HEPES：將23.8gHEPES溶于約90ml的水中，用NaOH調(diào)pH（6.8-8.2），然后用水定容**100ml。

1mol/L HCl：加8.6ml的濃鹽酸**91.4ml的水中。

25mg/ml IPGT：溶解250mg的IPGT（異丙基硫代-β-D-半乳糖苷）于10ml水中，分成小份貯存于-20℃。

1mol/LMgCl2:溶解20.3g MgCl2·6H2O于足量的水中，定容到100ml。

100mmol/L PMSF：溶解174mg的PMSF（苯甲基磺酰氟）于足量的異丙醇中，定容到10ml。分成小份并用鋁箔將裝液管包裹
或貯存于-20℃。

20mg/ml蛋白酶K（proteinase K）：將200mg的蛋白酶L加入到9.5ml水中，輕輕搖動(dòng)，直**蛋白酶K完全溶解。不要渦旋混合。加水定容到10ml，然后分裝成小份貯存于-20℃。

10mg/mlRnase（無(wú)DNase）（DNase－free RNase）：溶解10mg的胰蛋白R(shí)NA酶于1ml的10mmol/L的乙酸鈉水溶液中（pH 5.0）。溶解后于水浴中煮沸15min，使DNA酶失活。用1mol/L的Tris－HCl調(diào)pH**7.5，于-20℃貯存。（配制過(guò)程中要戴手套）

5mol/L氯化鈉（NaCl）：溶解29.2g氯化鈉于足量的水中，定容**100ml。

10N氫氧化鈉（NaOH）：溶解400g氫氧化鈉顆粒于約0.9L水的燒杯中（磁力攪拌器攪拌），氫氧化鈉完全溶解后用水定容**1L。

10％SDS（十二烷基硫酸鈉）：稱(chēng)取100gSDS慢慢轉(zhuǎn)移到約含0.9L的水的燒杯中，用磁力攪拌器攪拌直**完全溶解。用水定容**1L。

2mol/L山梨（糖）醇（Sorbitol）：溶解36.4g山梨（糖）醇于足量水中使終體積為100ml。

100％三氯乙酸（TCA）:在裝有500gTCA的試劑瓶中加入100ml水，用磁力攪拌器攪拌直**完全溶解。（稀釋液應(yīng)在臨用前配制）

2.5％ X－gal（5-溴-4-氯-3-吲哚－β-半乳糖苷）：溶解25mg的X－gal于1ml的二甲基甲酰胺（DMF）,用鋁箔包裹裝液管，貯存于-20℃。

100×Denhardt試劑（Denhardt's regent）

成分及終濃度
配制100ml溶液各成分的用量

2％聚蔗糖（Ficoll，400型）
2％聚乙烯吡咯烷酮（PVP-40）
2％BSA（組分V）
水
2g
2g
2g
加水**總體積為100ml


依照上表稱(chēng)取各組分，溶于水中定容。過(guò)濾除菌及雜質(zhì)，分裝成小份于-20℃貯存。

10×標(biāo)準(zhǔn)DNA連接酶緩沖液（standard DNA ligase buffer）（粘端、平端連接）

成分及終濃度
配制10ml溶液各成分的用量

0.5mol/L Tris-HCl
100mmol/L MgCl2
100mmol/L DTT
2mmol/L ATP
5mmol/L 鹽酸亞精胺（可選）
0.5mg/ml BSA（組分V）（可選）
水
5ml 1mol/L 貯液
1ml 1mol/L 貯液
1ml 1mol/L 貯液
200ul 100 mmol/L 貯液
50ul 1 mmol/L 貯液
0.5ml 10 mg/mL 貯液
2.25ml


將配制好的緩沖液分裝成小份，貯存于-20℃ 。

100 mmol/L dNTP 溶液（dNTP solutions）
可以購(gòu)買(mǎi)到100mmol/L純dNTPs貯液，-80℃可貯存**少6個(gè)月。

10mmol/L dNTP混合液

成分及終濃度
配制20ul溶液各成分的用量

10mmol/L dATP
10mmol/L dCTP
10mmol/L dGTP
10mmol/L dTTP
水
2ul 100 mmol/L dATP 貯液
2ul 100 mmol/L dCTP 貯液
2ul 100 mmol/L dGTP 貯液
2ul 100 mmol/L dTTP 貯液
12ul


20％PEG 8000/2.5M NaCl

成分及終濃度
配制10ml溶液各成分的用量

質(zhì)量濃度為20％聚乙二醇
2.5mol/L 氯化鈉
水
20g
50ml 5 mol/L 氯化鈉 或 14.6g 固體氯化鈉
補(bǔ)足100ml


加聚乙二醇于含有氯化鈉的燒杯中，加水**終體積100ml，用磁力攪拌器攪拌溶解。

20×SSC

成分及終濃度
配制1L溶液各成分的用量

300mmol/L 檸檬酸三鈉（二水）
3mol/L 氯化鈉
水
88.2g
175.3g
補(bǔ)足1L


溶解檸檬酸三鈉（二水）和氯化鈉于約0.9L水中，加幾滴10N NaOH溶液調(diào)pH為7.0，用水補(bǔ)足體積**1L。

DEPC（焦碳酸二乙酯）處理水
加100ul DEPC 于 100ml 水中，使DEPC的體積分?jǐn)?shù)為0.1％。在37℃溫浴**少12h，然后在15 psi 條件下高壓滅菌20min，以使殘余的DEPC失活。DEPC會(huì)與胺起反應(yīng)，不可用DEPC處理Tris緩沖液。

甲酰胺（deionized formamide）
直接購(gòu)買(mǎi)或加Dowex XG8 混合樹(shù)脂于裝有甲酰胺的玻璃燒杯中，用磁力攪拌器輕輕攪拌1h，可去除甲酰胺中的離子。經(jīng)Whatman 1號(hào)濾紙過(guò)濾除去樹(shù)脂后分成小份，充氮?dú)庥?80℃貯存（防止氧化）。

磷酸緩沖液（phosphate buffer）
按照下表所給定的體積，混合1 mol/L 的磷酸二氫鈉（單堿）和1mol/L 磷酸氫二鈉（雙堿）貯液，獲得所需pH的磷酸緩沖液。配制1 mol/L 的磷酸二氫鈉（NaH2PO4·H2O）貯液：溶解138g于足量水中，使終體積為1L;1mol/L 磷酸氫二鈉（Na2HPO4）貯液:溶解142g于足量水中使終體積為1L。

1mol/L 磷酸二氫鈉（ml）
1mol/L 磷酸氫二鈉（ml）
**終pH值

877
850
815
775
735
685
625
565
510
450
390
330
280
123
150
185
225
265
315
375
435
490
550
610
670
720
6.0
6.1
6.2
6.3
6.4
6.5
6.6
6.7
6.8
6.9
7.0
7.1
7.2


TE（用于懸浮和貯存DNA）

成分及終濃度
配制100ml溶液各成分的用量

10mmol/L Tris－HCl
1mmol/L EDTA
水
1ml 1mol/L Tris-HCl（pH7.4-8.0，25℃）
200ul 0.5 mol/L EDTA（pH 8.0）
98.8ml


Tris緩沖液（Tris-HCl buffer）
將121g的Tris堿溶解于約0.9L水中，再根據(jù)所要求的pH（25℃下）加一定量的濃鹽酸（11.6N），用水調(diào)整終體積**1L。

濃鹽酸的體積（ml）
pH

8.6
14
21
28.5
38
46
56
66
71.3
76
9.0
8.8
8.6
8.4
8.2
8.0
7.8
7.6
7.4
7.2


二.電泳緩沖液、染料和凝膠加樣液

電泳緩沖液

50×Tris-乙酸（TAE）緩沖液

成分及終濃度
配制1L溶液各成分的用量

2mol/L Tris堿
1mol/L 乙酸
100 mmol/L EDTA
水
242g
57.1 ml的冰乙酸（17.4 mol/L）
200ml的0.5 mol/L EDTA（pH 8.0）
補(bǔ)足1L


5×Tris-硼酸（TBE）緩沖液

成分及終濃度
配制1L溶液各成分的用量

445 mmol/L Tris堿
445 mmol/L 硼酸鹽
10 mmol/L EDTA
水
54g
27.5g 硼酸
20 ml的0.5 mol/L EDTA（pH 8.0）
補(bǔ)足1L


染料

1％溴酚藍(lán)（bromophenol blue）
加1g水溶性鈉型溴酚藍(lán)于100ml水中，攪拌或渦旋混合直到完全溶解。

1％二甲苯青FF（xylene cyanole FF）
溶解1g二甲苯青FF于足量水中，定容到100ml。

10mg/ml的溴化乙錠（ethidium bromide）
小心稱(chēng)取1g溴化乙錠，轉(zhuǎn)移到廣口瓶中，加100ml水，用磁力攪拌器攪拌直到完全溶解。用鋁箔包裹裝液管，于4℃貯存。

凝膠上樣液（gel loading solutions）
6×堿性凝膠上樣液（室溫貯存）

成分及終濃度
配制10ml溶液各成分用量

0.3 N 氫氧化鈉
6 mmol/L EDTA
18％聚蔗糖（400型）
0.15％溴甲酚綠
0.25％二甲苯青FF
水
300ul 10N 氫氧化鈉
120ul 0.5mol/L EDTA（pH8.0）
1.8g
15mg
25mg
補(bǔ)足到10ml


6×聚蔗糖凝膠上樣液（室溫貯存）

成分及終濃度
配制10ml溶液各成分用量

0.15％溴酚藍(lán)
0.15％二甲苯青FF
5 mmol/L EDTA
15％聚蔗糖（400型）
水
1.5ml 1％溴酚藍(lán)
1.5ml 1％二甲苯青FF
100ul 0.5mol/L EDTA（pH8.0）
1.5g
補(bǔ)足到10ml


6×溴酚藍(lán)/二甲苯青/聚蔗糖凝膠上樣液（室溫貯存）

成分及終濃度
配制10ml溶液各成分用量

0.25％溴酚藍(lán)
0.25％二甲苯青FF
15％聚蔗糖（400型）
水
2.5ml 1％溴酚藍(lán)
2.5ml 1％二甲苯青FF
1.5g
補(bǔ)足到10ml


6×甘油凝膠上樣液（4℃貯存）

成分及終濃度
配制10ml溶液各成分用量

0.15％溴酚藍(lán)
0.15％二甲苯青FF
5 mmol/L EDTA
50％甘油
水
1.5ml 1％溴酚藍(lán)
1.5ml 1％二甲苯青FF
100ul 0.5mol/L EDTA（pH8.0）
3ml
3.9ml


6×蔗糖凝膠上樣液（室溫貯存）

成分及終濃度
配制10ml溶液各成分用量

0.15％溴酚藍(lán)
0.15％二甲苯青FF
5 mmol/L EDTA
40％聚蔗糖
水
1.5ml 1％溴酚藍(lán)
1.5ml 1％二甲苯青FF
100ul 0.5mol/L EDTA（pH8.0）
4g
補(bǔ)足到10ml


10×十二烷基硫酸鈉/甘油凝膠上樣液（室溫貯存）

成分及終濃度
配制10ml溶液各成分用量

0.2％溴酚藍(lán)
0.2％二甲苯青FF
200 mmol/L EDTA
0.1％SDS
50％甘油
水
20mg
20mg
4ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
100ul 10％ SDS
5ml
補(bǔ)足到10ml


三.常用培養(yǎng)基

LB培養(yǎng)基
將下列組分溶解在0.9L水中：

蛋白胨
10g

酵母提取物
5g

氯化鈉
10g


如果需要用1N NaOH（～1ml）調(diào)整pH**7.0，再補(bǔ)足水**1L。注：瓊脂平板需添加瓊脂粉12g/L,上層瓊脂平板添加瓊脂粉7g/L。

SOB培養(yǎng)基
將下列組分溶解在0.9L水中：

蛋白胨
20g

酵母提取物
5g

氯化鈉
0.5g

1 mol/L 氯化鉀
2.5ml


用水補(bǔ)足體積到1L。分成100ml的小份，高壓滅菌。培養(yǎng)基冷卻到室溫后，再在每100ml的小份中加1ml滅過(guò)菌的1mol/L氯化鎂。

SOC培養(yǎng)基
成分、方法同SOB培養(yǎng)基的配制，只是在培養(yǎng)基冷卻到室溫后，除了在每100ml的小份中加1ml滅過(guò)菌的1mol/L氯化鎂外，再加2ml滅菌的1mol/L葡萄糖（18g葡萄糖溶于足夠水中，再用水補(bǔ)足到100ml，用0.22um的濾膜過(guò)濾除菌）。

TB培養(yǎng)基
將下列組分溶解在0.9L水中：

蛋白胨
12g

酵母提取物
24g

甘油
4ml


各組分溶解后高壓滅菌。冷卻到60℃，再加100ml滅菌的170mmol/L KH2PO4/0.72 mol/L K2HPO4的溶液（2.31g的KH2PO4和12.54gK2HPO4溶在足量的水中，使終體積為100ml。高壓滅菌或用0.22um的濾膜過(guò)濾除菌）。

2×YT培養(yǎng)基
將下列組分溶解在0.9L水中：

蛋白胨
16g

酵母提取物
10g

氯化鈉
4ml


如果需要用1N NaOH（～1ml）調(diào)整pH**7.0，再補(bǔ)足水**1L。注：瓊脂平板需添加瓊脂粉12g/L,上層瓊脂平板添加瓊脂粉7g/L。

YPD培養(yǎng)基
將下列組分溶解在0.9L水中：

蛋白胨
20g

酵母提取物
10g

葡萄糖
20g


用水補(bǔ)足體積為1L后，高壓滅菌。建議在高壓滅菌之前，對(duì)色氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型每升培養(yǎng)基添加1.6g色氨酸，因?yàn)閅PD培養(yǎng)基是色氨酸限制型培養(yǎng)基。為了配制平板，需要在高壓滅菌前加入20g瓊脂粉。

四.常用抗生素

氨芐青霉素（ampicillin）（100mg/ml）
溶解1g氨芐青霉素鈉鹽于足量的水中，**后定容**10ml。分裝成小份于-20℃貯存。常以25ug/ml～50ug/ml的終濃度添加于生長(zhǎng)培養(yǎng)基。

羧芐青霉素（carbenicillin）（50mg/ml）
溶解0.5g羧芐青霉素二鈉鹽于足量的水中，**后定容**10ml。分裝成小份于-20℃貯存。常以25ug/ml～50ug/ml的終濃度添加于生長(zhǎng)培養(yǎng)基。

甲氧西林（methicillin）（100mg/ml）
溶解1g甲氧西林鈉于足量的水中，**后定容**10ml。分裝成小份于-20℃貯存。常以37.5ug/ml終濃度與100ug/ml氨芐青霉素一起添加于生長(zhǎng)培養(yǎng)基。

卡那霉素（kanamycin）（10mg/ml）
溶解100mg卡那霉素于足量的水中，**后定容**10ml。分裝成小份于-20℃貯存。常以10ug/ml～50ug/ml的終濃度添加于生長(zhǎng)培養(yǎng)基。

氯霉素（chloramphenicol）（25mg/ml）
溶解250mg氯霉素足量的無(wú)水乙醇中，**后定容**10ml。分裝成小份于-20℃貯存。常以12.5ug/ml～25ug/ml的終濃度添加于生長(zhǎng)培養(yǎng)基。

鏈霉素（streptomycin）（50mg/ml）
溶解0.5g鏈霉素硫酸鹽于足量的無(wú)水乙醇中，**后定容**10ml。分裝成小份于-20℃貯存。常以10ug/ml～50ug/ml的終濃度添加于生長(zhǎng)培養(yǎng)基。

萘啶酮酸（nalidixic acid）（5mg/ml）
溶解50mg萘啶酮酸鈉鹽于足量的水中，**后定容**10ml。分裝成小份于-20℃貯存。常以15ug/ml的終濃度添加于生長(zhǎng)培養(yǎng)基。

四環(huán)素（tetracyyline）（10mg/ml）
溶解100mg四環(huán)素鹽酸鹽于足量的水中，或者將無(wú)堿的四環(huán)素溶于無(wú)水乙醇，定容**10ml。分裝成小份用鋁箔包裹裝液管以免溶液見(jiàn)光，于-20℃貯存。常以10ug/ml～50ug/ml的終濃度添加于生長(zhǎng)培養(yǎng)基。